細胞離心機離心分離純化法可以避免二次污染
2020-03-26(1058)次瀏覽
細胞離心機通過離心技術(shù)使得細胞分離,是一種物質(zhì)分離,不通過介質(zhì),就不出現(xiàn)二次污染。
細胞離心機采用的就是離心分離純化法:
離心方法,包括差速離心法和密度梯度離心法,密度梯度離心法又分為速度-區(qū)帶密度梯度離心法和等密度梯度離心法。在選用合理的方法對細胞或組織進行破碎后,首先要進行差速離心法,即根據(jù)不同離心速度所產(chǎn)生的不同離心力將各種細胞組分和顆粒分離開來。各種細胞器和顆粒典型的差速離心順序見下表。
細胞離心機是利用離心力對混合液(含有固形物)進行分離和沉淀的一種專用儀器。細胞離心機有低速、高速離心機和低速、細胞離心機,以及超速分析、制備兩用冷凍離心機等多種型號。而細胞離心機是帶制冷系統(tǒng)的高速離心機。這種離心機的離心腔溫度通??山抵亮銛z氏度以下。轉(zhuǎn)速可達10000rpm以上,具有冷凍離心機的性能和結(jié)構(gòu)外,細胞離心機所用角式轉(zhuǎn)頭多采用用鈦合金或鋁合金制成。離心管為具蓋聚乙烯硬塑料制品。這類離心機多用于收集微生物、細胞碎片、細胞、大的細胞器、硫酸沉淀物以及免疫沉淀物等。那么,操作細胞離心機需要重點關(guān)注的問題有哪些呢?
操作細胞離心機需要注意的事項:
1.離心管內(nèi)裝載的溶液量必須合適,不銹鋼管無蓋,只能裝2/3,塑料管可裝至肩部。管蓋必須蓋嚴絕不允許漏液??展茈x心會變形。塑料管使用有機溶劑必須符合規(guī)定。
2.離心管必須成對放置,必須嚴格平衡,偏差<0.1g。
3.不允許無轉(zhuǎn)頭空轉(zhuǎn),放取轉(zhuǎn)頭必須用手柄,以防轉(zhuǎn)頭滑落。轉(zhuǎn)頭要輕放、卡穩(wěn),旋下手柄時要用手扶住手柄只轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)頭。轉(zhuǎn)頭蓋要蓋嚴,無蓋不準(zhǔn)離心。
4.細胞離心機離心時不準(zhǔn)打開機蓋,不準(zhǔn)扒扶在離心機上,如有異常聲音和振動時立即停機。
5.轉(zhuǎn)頭使用后必須及時由轉(zhuǎn)頭室中取出、擦干,用擦孔棒將管孔仔細擦凈。如有溶液溢出必須清洗干凈,擦凈轉(zhuǎn)頭室內(nèi)凝水,開門涼干轉(zhuǎn)頭室。
6.使用離心機必須預(yù)約,用后必須登記。
7.未經(jīng)過培訓(xùn)和考核者不能使用。
8.選擇合適的轉(zhuǎn)頭和轉(zhuǎn)速,絕不可超速使用。
9.選擇合適的溫度,通常4℃,除有機溶劑外不要低于零下,以免冰凍,損壞離心管和轉(zhuǎn)頭。
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